产品货号:
JN5012
中文名称:
热启动Taq DNA聚合酶(无甘油)
英文名称:
HotStart Taq DNA Polymerase,Glycerol-Free
产品规格:
250U|2500U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是Taq酶经特殊工艺处理后的制品,经化学修饰后的Taq酶在加热至高温前,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量(>60%),有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。
本制品不包含甘油等影响冻干工艺的成分,可用于冻干反应体系的配制和产品设计。
高特异性PCR反应;复杂模板扩增;Multiplex PCR;基因组扩增检测;荧光定量PCR。
热激活后,在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTPs的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
组分 | 250U | 2500U |
热启动Taq DNA聚合酶(无甘油,5U/μL) | 50μL | 500μL |
5×HS Taq Buffer with Mg2+ | 1mL×2 | 10mL×2 |
保存:-20℃
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
5×HS Taq Buffer不可用于冻干。
- 常用反应体系(50μL):
成分 用量 5×HS Taq Buffer with Mg2+ 10μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) dNTPs (10mM each) 1μL 模板 1~50ng(质粒)
10ng~1μg(基因组)热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL) 0.25μL (1.25U) ddH2O 至50μL - 常用PCR反应程序:
- 两步法:
反应阶段 循环数 温度 时间 预变性 1 94℃ 5min 变性 30 94℃ 5s 退火/延伸 68℃ 1kb/60s 终延伸 1 72℃ 5min 保温 1 4℃ - - 三步法:
反应阶段 循环数 温度 时间 预变性 1 94℃ 5min 变性 30 94℃ 20s 退火 50~60℃ 20s 延伸 72℃ 1kb/60s 终延伸 1 72℃ 5min 保温 1 4℃ -
- 两步法:
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